1º Autor: Mariana de Sousa Pinheiro
UTAD, Vila Real; FMUP, Porto; RISE-Health
Coautores: Martins-Oliveira, I. (FASTinov, SA Porto); Abreu D. (FASTinov, SA Porto); Gomes R. (FASTinov, SA Porto); Silva-Dias A. (FASTinov, SA Porto); Poeta, P. (Microbiology and Antibiotic Resistance Team (MicroART), UTAD, Vila Real; Veterinary and Animal Research Centre (CECAV), UTAD, Vila Real; Associate Laboratory for Animal and Veterinary Sciences (AL4AnimalS), Portugal); Pina-Vaz C. (FASTinov, SA Porto; FMUP, Porto; RISE-Health); Soares, A.J. (RISE-Health; FMUP, Porto)
Resumo
As infeções do trato urinário (UTIs) compõe as principais infeções bacterianas encontradas quer na rotina hospitalar quer no ambulatório. Como microrganismo mais frequentemente isolado é descrita E. coli (75-90%) seguida de outros bacilos de Gram-negativo, mas também cocos de Gram-positivo. Os métodos de diagnóstico convencionais são demorados, baseando-se na cultura seguida de identificação (ID) e teste de sensibilidade antimicrobiana (TSA), com resultados que demoram em média 48h. Isto leva, frequentemente, ao uso de terapias empíricas, por vezes com espetros mais alargado do que o necessário, com impacto inevitável na propagação da resistência a antimicrobianos (AMR).
A FASTinov® desenvolveu um método fenotípico através de dois kit’s de análise por Citometria de Fluxo que permite testar a suscetibilidade antimicrobiana em urinas positivas em apenas 2h.
Através de urinas inoculadas com estirpes bacterianas conhecidas, foi realizada a avaliação de dois kits, o FASTgramneg para GRAM negativos (GN) e o FASTgrampos para GRAM positivos (GP). O FASTgramneg inclui Ampicilina, Amoxicilina com Acido Clavulanico, Cefotaxime, Ceftazidima, Cefepime, Piperacilina-Tazobactam, Ceftolozane-Tazobactam, Ceftazidima-Avibactam, Meropenem, Ciprofloxacina, Gentamicina, Amicacina, Nitrofurantoina e Fosfomicina (estes dois últimos apenas em E. coli). No caso do FASTgrampos, inclui Ampicilina, Cefoxitina, Gentamicina, Linezolide, Oxacilina, Penicilina e Vancomicina. Posteriormente os resultados foram interpretados através de um software criado para o efeito, dando resultados de acordo com os critérios EUCAST, obtendo-se uma caracterização de Resistente, Intermédio ou Suscetível. O kit FASTgramneg fornece identificação acercade mecanismos de resistência como presença de ESBLs e screening de AMPc e carbapenemases.
No presente estudo foram utilizadas 154 amostras, 77 das quais eram GN e 77 GP. Em todas foi confirmada a identificação direta através do uso do QUICKprep® e MALDI-TOF.
Os painéis foram inoculados e incubados durante 1 hora, após a qual foram analisados por Citometria de Fluxo utilizado o DxFLEX (Beckman, CA).
Observou-se concordância em 97,5% nas bactérias Gram Negativas e 95% nas Gram positivas, quando comparado ao método de referência. Os valores de sensibilidade e especificidade, foram respetivamente, no FASTgramneg de 96,3% e 97,8% e no FASTgrampos de 92,2% e 96,3%. O método estudado foi ainda capaz de identificar corretamente todos os mecanismos de resistência, com nenhum falso positivo.
Desta forma, concluímos que os kit’s FASTgramneg e FASTgrampos foram capazes de fornecer resultados numa média de 2h, ao invés das 48h do método convencional. Estes dados evidenciam o potencial desta tecnologia no diagnostico e posterior tratamento das UTI’s, acelerando todo o processo com resultados igualmente fiáveis e diminuído o tempo de espera e a necessidade de terapia empírica.